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產品詳情
簡單介紹:
PA317細胞株源自TK- NIH/3T3細胞,通過pBR322中的包裝結構DNA(pPAM3)和pBR322中的單純皰疹病毒胸苷激酶基因共同轉染構建而成。 通過感染或轉染將逆轉錄病毒載體導入這些細胞,結果生成可以感染許多哺乳動物細胞的雙嗜性載體顆粒。 這株細胞生成的病毒顆粒已成功地用於將基因導入人類。 可能因為用於構建這株細胞而轉入的DNA丟失,能夠包裝逆轉錄病毒載體的PA317細胞百分比隨傳代
詳情介紹:
細胞名稱 | PA317小鼠成纖維細胞 |
描述 | PA317細胞株源自TK- NIH/3T3細胞,通過pBR322中的包裝結構DNA(pPAM3)和pBR322中的單純皰疹病毒胸苷激酶基因共同轉染構建而成。 通過感染或轉染將逆轉錄病毒載體導入這些細胞,結果生成可以感染許多哺乳動物細胞的雙嗜性載體顆粒。 這株細胞生成的病毒顆粒已成功地用於將基因導入人類。 可能因為用於構建這株細胞而轉入的DNA丟失,能夠包裝逆轉錄病毒載體的PA317細胞百分比隨傳代而減少。 在包含0.03 mM 次黃嘌呤, 0.001 mM 氨甲喋呤和0.02 mM 胸苷的培養基中短暫(大約5天)選擇,可以選出保留了包裝功能的細胞。 選擇後,細胞應在HT培養基(0.03 mM 次黃嘌呤,0.02 mM 胸苷)中培養4天,以稀釋殘留的氨甲喋呤。 Cells shipped from the ATCC have been selected in medium containing 0.03 mM hypoxanthine, 0.001 mM amethopterin (methotrexate), and 0.02 mM thymidine prior to freezing, and should be grown in HT medium for 4 days after receipt. 此後細胞不需選擇可以穩定至少1個月。 |
動物種彆 | 小鼠 |
性彆 | |
組織來源 | 胚胎 |
形態 | 成纖維細胞 |
培養基和添加劑 | 含1.5g/L 碳酸氫鈉, 4.5g/L 葡萄糖, 4mM L-穀氨酰胺的DMEM,90%;胎牛血清或新生牛血清,10%。 |
供應限製 | A。僅供研究之用。 |
REFERENCE | Miller AD , Buttimore C . Redesign of retrovirus packaging cell lines to avoid recombination leading to helper virus production. Mol. Cell. Biol. 6: 2895-2902, 1986. PubMed: 3785217 Miller AD . DNA contructs for retrovirus packaging cell lines. US Patent 4,861,719 dated Aug 29 1989 Rosenberg SA , et al. Gene transfer into humans--immunotherapy of patients with advanced melanoma, using tumor-infiltrating lymphocytes modified by retroviral gene transduction. N. Engl. J. Med. 323: 570-578, 1990. PubMed: 2381442 Chin J Cell Mol Immunol 18(2):146-148, 2002 Shanghai Immunol Journal 23(1):16-19,2003 |