Histo-Clear II量化使用手冊

一．脫水後透明

l Histo-Clear II的透明時間可以延長至2-4小時達到更好的透明效果並且不用擔心標本變硬變脆。

l 37℃比常溫25℃更易於組織塊的脫水後透明並且節省試劑的用量和處理的時間。

l 在Histo-Clear II透明前還可以增加無水異丙醇步驟（去除痕量水）從而減少Histo-Clear II的用量。

l 一般來說2.5L-3L Histo-Clear II可以處理1250-1500個組織塊，具體數量可能視組織塊的大小厚薄而發生變化,各實驗室可在這個基礎上摸索出適合自己的處理通量。

l 達到試劑處理量上限時應及時更換，更換可以采用前移法，大程度增加透明劑的利用度和保證組織處理的效果。所謂前移法是指，通常的脫水後透明含有三道Histo-Clear II透明處理，當一道Histo-Clear II達到處理上限時，將一道透明劑溶液棄去，後續的兩道透明劑溶液依次前移，而在後一道換上新鮮的透明劑。

二．脫蠟

l Histo-Clear II的脫蠟時間視溫度和組織切片的類型厚薄（3µm or 4µm）而定，一般來說室溫25℃時，2-3道脫蠟總時長在10min-50min可以保證脫蠟完全。

l 以4µm切片為例，500ml Histo-Clear II大致可以處理700張片子左右，更細化的數字還需視各實驗室的具體情況而定。**通過預實驗掌握Histo-Clear II對自己工作中所使用的石蠟的溶解速率，從而科學的量化每道Histo-Clear II的使用體積、處理時間以及更換的時機。

l 更換同樣可以采用前移法來節省用量。

三．染色後透明

與脫蠟基本類似也受溫度、切片厚薄等因素影響，一般2-3道，每道5-10min。以4µm切片為例，500ml Histo-Clear II大致可以處理750張片子左右，具體處理量可以自己摸索後確定。更換仍然可以采用前移法，既不影響透明效果也可以節省試劑用量。