文章詳情

Histo-clear II 環保型組織脫蠟透明劑使用參考(2)

日期:2025-04-30 14:12
瀏覽次數:10869
摘要: Histo-Clear II是一個可生物降解的環保透明劑(完全替代二甲苯),用於脫水後透明,脫蠟及封片前透明等步驟。 Omnimount是National Diagnostics公司的環保型封片劑產品。 1.有關Histo-Clear II的量化使用 一.脫水後透明 Histo-Clear II的透明時間可以延長至2-4小時達到更好的透明效果並且不用擔心標本變硬變脆。 37℃比常溫25℃更易於組織塊的脫水後透明並且節省試劑的用量和處理的時間。 在Histo-Clear II透明前還可以增加無水異丙醇步驟(去除痕量水)從而減少Histo-Clear...

Histo-Clear II是一個可生物降解的環保透明劑(完全替代二甲苯),用於脫水後透明,脫蠟及封片前透明等步驟。

OmnimountNational Diagnostics公司的環保型封片劑產品。

1.有關Histo-Clear II的量化使用

一.脫水後透明

Histo-Clear II的透明時間可以延長至2-4小時達到更好的透明效果並且不用擔心標本變硬變脆。

37℃比常溫25℃更易於組織塊的脫水後透明並且節省試劑的用量和處理的時間。

Histo-Clear II透明前還可以增加無水異丙醇步驟(去除痕量水)從而減少Histo-Clear II的用量。

一般來說2.5L-3L Histo-Clear II可以處理1250-1500個組織塊,具體數量可能視組織塊的大小厚薄而發生變化,各實驗室可在這個基礎上摸索出適合自己的處理通量。

達到試劑處理量上限時應及時更換,更換可以采用前移法,大程度增加透明劑的利用度和保證組織處理的效果。所謂前移法是指,通常的脫水後透明含有三道Histo-Clear II透明處理,當一道Histo-Clear II達到處理上限時,將一道透明劑溶液棄去,後續的兩道透明劑溶液依次前移,而在後一道換上新鮮的透明劑。

二.脫蠟

Histo-Clear II的脫蠟時間視溫度和組織切片的類型厚薄(3µm or 4µm)而定,一般來說室溫25℃時,2-3道脫蠟總時長在10min-50min可以保證脫蠟完全。

4µm切片為例,500ml Histo-Clear II大致可以處理700張片子左右,更細化的數字還需視各實驗室的具體情況而定。**通過預實驗掌握Histo-Clear II對自己工作中所使用的石蠟的溶解速率,從而科學的量化每道Histo-Clear II的使用體積、處理時間以及更換的時機。

更換同樣可以采用前移法來節省用量。

三.染色後透明

與脫蠟基本類似也受溫度、切片厚薄等因素影響,一般2-3道,每道5-10min。以4µm切片為例,500ml Histo-Clear II大致可以處理750張片子左右,具體處理量可以自己摸索後確定。更換仍然可以采用前移法,既不影響透明效果也可以節省試劑用量。

2.有關環保型封片劑Omnimount的操作建議

1.將玻片垂直置於紙巾上瀝乾多餘的Histo-Clear II(組織透明劑 II,用紙巾擦去玻片背麵多餘的Histo-Clear II(組織透明劑 II

2.將玻片置於一個水平麵上並用滴頭滴上一滴Omnimount封片劑。

3.蓋片傾斜與玻片成45°並且使底部邊緣接觸Omnimount封片劑,隨著封片劑的擴散緩慢的放下蓋片。

4.多餘的封片劑可以在濕的時候用紙巾擦去或者等待乾時用刀片切去。提高溫度可以使乾燥過程加速。

3.Histo-Clear II 手動操作流程表

 

Histo-Clear II (組織透明劑 II脫蠟步驟

試劑

時間 ()

Histo-Clear II(組織透明劑 II

5-10

Histo-Clear II(組織透明劑 II

5-10

10% ethanol, 90% Histo-Clear II10乙醇,90%組織透明劑 II

5-10

Absolute alcohol(乙醇)

5-10

Absolute alcohol(乙醇)

5-10

95% ethanol95% 乙醇)

5-10

80% ethanol80乙醇)

5-10

70% ethanol70乙醇)

5-10

Histo-Clear II (組織透明劑 II封片前透明步驟

試劑

時間 ()

95% ethanol95% 乙醇)

5

95% ethanol95% 乙醇)

5

Absolute alcohol(乙醇)

5

Absolute alcohol(乙醇)

5

Histo-Clear II(組織透明劑 II

5

Histo-Clear II(組織透明劑 II

5

產品鏈接產品鏈接:

http://www.sangerbio.com/

http://www.sangerbio.com/s18/p20666529.html

http://www.sangerbio.com/s18/p16608011.html

滬公網安備 31010902002433號