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**組織化學ＩＨＣ的概念

日期：2025-06-17 05:10

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摘要： **組化是利用抗原與抗體特異性結合的原理，通過化學反應使標記抗體的顯色劑(熒光素、酶、金屬離子、同位素)顯色來確定組織細胞內抗原(多肽和蛋白質)，對其進行定位、定性及定量的研究，稱為**組織化學。 **組化實驗所用的抗體有哪些？ **組化實驗中常用的抗體為單克隆抗體和多克隆抗體。單克隆抗體是一個B**細胞克隆分泌的抗體，應用細胞融合雜交瘤技術**動物製備。多克隆抗體是將純化後的抗原直接**動物後，從動物血中所獲得的**血清，是多個B**細胞克隆所產生的抗體混合物。 **組化實...

**組化是利用抗原與抗體特異性結合的原理，通過化學反應使標記抗體的顯色劑(熒光素、酶、金屬離子、同位素)顯色來確定組織細胞內抗原(多肽和蛋白質)，對其進行定位、定性及定量的研究，稱為**組織化學。

    **組化實驗所用的抗體有哪些？
   **組化實驗中常用的抗體為單克隆抗體和多克隆抗體。單克隆抗體是一個B**細胞克隆分泌的抗體，應用細胞融合雜交瘤技術**動物製備。多克隆抗體是將純化後的抗原直接**動物後，從動物血中所獲得的**血清，是多個B**細胞克隆所產生的抗體混合物。

    **組化實驗所用的組織和細胞標本有哪些？
   實驗所用主要為組織標本和細胞標本兩大類，前者包括石蠟切片（病理大片和組織芯片）和冰凍切片，後者包括組織印片、細胞爬片和細胞塗片。
其中石蠟切片是製作組織標本常用、基本的方法，對於組織形態保存好，且能作連續切片，有利於各種染色對照觀察；還能長期存檔，供回顧性研究；石蠟切片製作過程對組織內抗原暴露有一定的影響，但可進行抗原修複，是**組化中先選的組織標本製作方法。

    石蠟切片為什麼要做抗原修複？有哪些方法？
   石蠟切片標本均用甲醛固定，使得細胞內抗原形成醛鍵、羧甲鍵而被封閉了部分抗原決定簇，同時蛋白之間發生交聯而使抗原決定簇隱蔽。所以要求在進行IHC染色時，需要先進行抗原修複或暴露，即將固定時分子之間所形成的交聯破壞，而恢複抗原的原有空間形態。
常用的抗原修複方法有微波修複法，高壓加熱法，酶消化法，水煮加熱法等，常用的修複液是pH6.0的0.01mol/L的檸檬酸鹽緩衝液。

    **組化常用的染色方法有哪些？
   根據標記物的不同分為**熒光法，**酶標法，親和組織化學法，後者是以一種物質對某種組織成分具有高度親合力為基礎的檢測方法。這種方法敏感性更高，有利於微量抗原(抗體)在細胞或亞細胞水平的定位，其中生物素——抗生物素染色法常用。

    抗體交叉反應的原因：
    指抗體除與其相應的抗原發生特異性反應外還與其它抗原發生反應。產生的原因有以下幾個方麵：
   1.抗原特異性指用於**動物的抗原性物質中含有多種抗原分子，它引起動物產生針對多種抗原分子特異性的相應抗體。任何其它物質隻要含有一種或多種與上述物質相同的抗原分子，必將與上述多特異性的抗血清發生交叉反應。
    2. 共同決定簇即兩種抗原分子中都含有相同的抗原決定簇。
   3.決定簇相似，兩種不同的抗原決定簇，如果結構大致相同，由於空間構象關係，某一決定簇的相應抗體可以與大致相同的決定簇發生交叉反應。當然抗原一抗體之間構象相似時的結合力小於吻合時的結合力。

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