Histo-Clear II是一个可生物降解的环保透明剂（完全替代二甲苯），用于脱水后透明，脱蜡及封片前透明等步骤。

Omnimount是National Diagnostics公司的环保型封片剂产品。

1.有关Histo-Clear II的量化使用

一．脱水后透明

Histo-Clear II的透明时间可以延长至2-4小时达到更好的透明效果并且不用担心标本变硬变脆。

37℃比常温25℃更易于组织块的脱水后透明并且节省试剂的用量和处理的时间。

在Histo-Clear II透明前还可以增加无水异丙醇步骤（去除痕量水）从而减少Histo-Clear II的用量。

一般来说2.5L-3L Histo-Clear II可以处理1250-1500个组织块，具体数量可能视组织块的大小厚薄而发生变化,各实验室可在这个基础上摸索出适合自己的处理通量。

达到试剂处理量上限时应及时更换，更换可以采用前移法，大程度增加透明剂的利用度和保证组织处理的效果。所谓前移法是指，通常的脱水后透明含有三道Histo-Clear II透明处理，当一道Histo-Clear II达到处理上限时，将一道透明剂溶液弃去，后续的两道透明剂溶液依次前移，而在后一道换上新鲜的透明剂。

二．脱蜡

Histo-Clear II的脱蜡时间视温度和组织切片的类型厚薄（3µm or 4µm）而定，一般来说室温25℃时，2-3道脱蜡总时长在10min-50min可以保证脱蜡完全。

以4µm切片为例，500ml Histo-Clear II大致可以处理700张片子左右，更细化的数字还需视各实验室的具体情况而定。**通过预实验掌握Histo-Clear II对自己工作中所使用的石蜡的溶解速率，从而科学的量化每道Histo-Clear II的使用体积、处理时间以及更换的时机。

更换同样可以采用前移法来节省用量。

三．染色后透明

与脱蜡基本类似也受温度、切片厚薄等因素影响，一般2-3道，每道5-10min。以4µm切片为例，500ml Histo-Clear II大致可以处理750张片子左右，具体处理量可以自己摸索后确定。更换仍然可以采用前移法，既不影响透明效果也可以节省试剂用量。

2.有关环保型封片剂Omnimount的操作建议

1.将玻片垂直置于纸巾上沥干多余的Histo-Clear II（组织透明剂 II），用纸巾擦去玻片背面多余的Histo-Clear II（组织透明剂 II）。

2.将玻片置于一个水平面上，并用滴头滴上一滴Omnimount封片剂。

3.盖片倾斜与玻片成45°并且使底部边缘接触Omnimount封片剂，随着封片剂的扩散缓慢的放下盖片。

4.多余的封片剂可以在湿的时候用纸巾擦去或者等待干时用刀片切去。提高温度可以使干燥过程加速。

3.Histo-Clear II 手动操作流程表

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http://www.sangerbio.com/s18/p16608011.html