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Histo-clear II 环保型组织脱蜡透明剂使用参考(2)

日期:2019-11-13 06:15
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摘要: Histo-Clear II是市场上**个可生物降解的环保透明剂(完全替代二甲苯),广泛用于脱水后透明,脱蜡及封片前透明等步骤。 Omnimount是National Diagnostics公司的*新优异环保型封片剂产品。 1.有关Histo-Clear II的量化使用 一.脱水后透明 Histo-Clear II的透明时间可以延长至2-4小时达到更好的透明效果并且不用担心标本变硬变脆。 37℃比常温25℃更易于组织块的脱水后透明并且节省试剂的用量和处理的时间。 在Histo-Clear II透明前还可以增加无水异丙醇步骤(去除痕量水)...

Histo-Clear II是市场上**个可生物降解的环保透明剂(完全替代二甲苯),广泛用于脱水后透明,脱蜡及封片前透明等步骤。

OmnimountNational Diagnostics公司的*新优异环保型封片剂产品。

1.有关Histo-Clear II的量化使用

一.脱水后透明

Histo-Clear II的透明时间可以延长至2-4小时达到更好的透明效果并且不用担心标本变硬变脆。

37℃比常温25℃更易于组织块的脱水后透明并且节省试剂的用量和处理的时间。

Histo-Clear II透明前还可以增加无水异丙醇步骤(去除痕量水)从而减少Histo-Clear II的用量。

一般来说2.5L-3L Histo-Clear II可以处理1250-1500个组织块,具体数量可能视组织块的大小厚薄而发生变化,各实验室可在这个基础上摸索出适合自己的处理通量。

达到试剂处理量上限时应及时更换,更换可以采用前移法,*大程度增加透明剂的利用度和保证组织处理的效果。所谓前移法是指,通常的脱水后透明含有三道Histo-Clear II透明处理,当**道Histo-Clear II达到处理上限时,将**道透明剂溶液弃去,后续的两道透明剂溶液依次前移,而在*后一道换上新鲜的透明剂。

二.脱蜡

Histo-Clear II的脱蜡时间视温度和组织切片的类型厚薄(3µm or 4µm)而定,一般来说室温25℃时,2-3道脱蜡总时长在10min-50min可以保证脱蜡完全。

4µm切片为例,500ml Histo-Clear II大致可以处理700张片子左右,更细化的数字还需视各实验室的具体情况而定。推荐通过预实验掌握Histo-Clear II对自己工作中所使用的石蜡的溶解速率,从而科学的量化每道Histo-Clear II的使用体积、处理时间以及更换的时机。

更换同样可以采用前移法来节省用量。

三.染色后透明

与脱蜡基本类似也受温度、切片厚薄等因素影响,一般2-3道,每道5-10min。以4µm切片为例,500ml Histo-Clear II大致可以处理750张片子左右,具体处理量可以自己摸索后确定。更换仍然可以采用前移法,既不影响透明效果也可以节省试剂用量。

2.有关环保型封片剂Omnimount的操作建议

1.将玻片垂直置于纸巾上沥干多余的Histo-Clear II(组织透明剂 II,用纸巾擦去玻片背面多余的Histo-Clear II(组织透明剂 II

2.将玻片置于一个水平面上并用滴头滴上一滴Omnimount封片剂。

3.盖片倾斜与玻片成45°并且使底部边缘接触Omnimount封片剂,随着封片剂的扩散缓慢的放下盖片。

4.多余的封片剂可以在湿的时候用纸巾擦去或者等待干时用刀片切去。提高温度可以使干燥过程加速。

3.Histo-Clear II 手动操作流程表

 

Histo-Clear II (组织透明剂 II脱蜡步骤

试剂

时间 ()

Histo-Clear II(组织透明剂 II

5-10

Histo-Clear II(组织透明剂 II

5-10

10% ethanol, 90% Histo-Clear II10乙醇,90%组织透明剂 II

5-10

Absolute alcohol(乙醇)

5-10

Absolute alcohol(乙醇)

5-10

95% ethanol95% 乙醇)

5-10

80% ethanol80乙醇)

5-10

70% ethanol70乙醇)

5-10

Histo-Clear II (组织透明剂 II封片前透明步骤

试剂

时间 ()

95% ethanol95% 乙醇)

5

95% ethanol95% 乙醇)

5

Absolute alcohol(乙醇)

5

Absolute alcohol(乙醇)

5

Histo-Clear II(组织透明剂 II

5

Histo-Clear II(组织透明剂 II

5

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